Informe de investigador

Informe científico de investigador: Di Rocco, Florencia (2014)

Resumen

Los genes ASIP y MC1R son los principales responsables de la determinación de los colores básicos de capa en mamíferos. Otros genes, actúan como modificadores, produciendo así fenotipos diversos. La ausencia de coloración (blanco) puede tener dos orígenes: que no se sinteticen pigmentos en los melanocitos por bloqueo de la ruta de sintesis de melanina, o la ausencia de melanocitos causada por bloqueo del desarrollo o migración de los mismos. El gen KIT tiene un rol central en la melanogénesis y en la migración y proliferación del melanoblasto (precursor del melanocito). Otro gen asociado con color de capa blanco no albino es MITF (factor de transcripción asociado a microftalmia). MITF es un regulador clave en la pigmentación que actúa sobre la diferenciación de los melanocitos por medio de la regulación de la expresión de proteínas del melanosoma. Mutaciones en este gen y también en KIT, han sido asociadas gran variedad de fenotipos diluídos, manchados y completamente blancos. La llama (Lama glama) presenta una amplia variedad de colores de distinto valor comercial. Sin embargo, con excepción de un trabajo realizado en Laboratorio de Genética Molecular del IMBICE (manuscrito en preparación), no se han descripto los genes que controlan la pigmentación en esta especie. Durante el año 2014, se concluyó la caracterización de los genes MC1R y ASIP, en el marco de una tesis doctoral. Mediante la secuenciación de la región codificante completa de ambos genes, se identificaron tres variantes alélicas principales.Una de ellas, MC1R*2, estuvo asociada a la ausencia de pigmentación en la capa (p<0.0001). Actualmente, se esta trabajando en el desarrollo de una metodología que permita detectar esa variante a bajo costo. Sin embargo, la presencia de este alelo no explica la totalidad de los fenotipos blancos. Por ello, se comenzó también con la caracterización de KIT. Se tomaron biopsias de piel (4 mm de diámetro) y muestras de fibra de distintos colores y se almcenaron en RNAlater® para su traslado al laboratorio, donde se conservaron a -80 C. hasta el momento de procesarlas. El ARN se obtuvo por homogenización en Trizol (Invitrogen) y a partir del mismo se realizó una reacción de PCR de fase reversa para obtener el cADN total. Mediante el uso de 4 pares de primers diseñados sobre secuencias conservadas en otras especies, se amplificó el gen c-KIT en llamas y se secuenció. Hasta el momento, se obtuvieron aproximadamente 1500 pb en 5 individuos diferentes, donde se identificaron 2 polimorfismos de tipo SNP. Uno de ellos, resultó no sinónimos produciendo la sustitución de un aminoácido Valina por una Leucina. La obtención de la secuencia completa en un número mayor de animales permitirá la identificación de polimorfismos adicionales y el estudio de su asociación con el color de capa en las llamas. Las principal dificultad encontrada en el plano metodológico estuvo en principio relacionada a la obtención de muestras. De todas maneras, esto pudo ser solucionado. En los últimos años el numero de establecimientos dedicados a la cría de llamas en la provincia de Buenos Aires ha aumentado considerablemente y en general los criadores muestran interés en el tema de investigación. Se espera en un futuro poder transferir los resultados al sector productivo, pero para ello, la principal limitación es la falta de financiación para acelerar los tiempos de concreción de este proyecto.

Palabras clave
Genética
llama
Pigmentación
http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/

Esta obra se publica con la licencia Creative Commons Attribution 4.0 International (BY 4.0)

item.page.license
Imagen en miniatura