Informe de becario

Informe científico de Beca de Estudio: Morell, Malena (2014)

Resumen

Durante este último tiempo continué la investigación en los dos proyectos que me encontraba involucrada: "Mecanismos subcelulares involucrados en las arritmias ventriculares inducidas por autoanticuerpos asociados con la enfermedad de chagas" (Proyecto 1), y "Estudio de la producción de óxido nítrico inducida por hinchamiento hipotónico y su potencial impacto sobre el manejo del calcio intracelular, la contractilidad miocárdica y la viabilidad celular" (Proyecto 2). En cuanto a las técnicas utilizadas, realicé mis tareas con las técnicas aprendidas con anterioridad: aislamiento de miocitos, utilización de microscopio invertido de fluorescencia para medir contractilidad y Ca2+ intracelular con video detección de bordes en miocitos aislados y la utilización del microscopio confocal para medir Ca2+ citosólico. También, en esta etapa realicé experimentos bioquímicos utilizando la técnica Western Blot en el proyecto 1. El Proyecto 1 tiene como objetivo general el estudio de los mecanismos subcelulares involucrados en las arritmias inducidas por autoanticuerpos obtenidos de pacientes en la etapa crónica de la enfermedad de Chagas y el Proyecto 2 propone examinar si el hinchamiento hipotónico de miocitos cardiacos promueve la liberación de NO y de ser así, evaluar su impacto sobre el acoplamiento excito-contráctil cardíaco. En cuanto a las dificultades encontradas puedo mencionar aquella relacionada con la no correlación encontrada entre el ensayo de western blot y los experimentos funcionales en el Proyecto 1. En el ensayo mencionado, pudimos detectar la fosforilación del sitio Ser16 a concentraciones de 50 y 100 nM tanto del agonista beta adrenergico Isoproterenol como del Autoanticuerpo contra el receptor beta 1, ambos involucrados en la activación de la cascada beta adrenérgica. Cuando realicé experimentos funcionales en miocitos aislados con esas dosis pudimos observar un inotropismo positivo característicon con Isoproterenol pero no con el anticuerpo. Asi mismo, el Isoproterenol indujo un aumento significativo de contracciones espontáneas(indicativo de arritmias) en tanto, el Ac no produjo un aumento de este sustrato arritmogénico. En cuanto al Proyecto 2, no surgieron problemáticas dificultosas de resolver. Este último proyecto nos llevó a poder generar un manuscrito que se encuentra en revisión en la revista Cardiovascular Research en la cuál comparto primera autoria.

Palabras clave
Enfermedades Cardiovasculares
Arritmias Cardíacas
Anticuerpos
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