Informe de becario

Informe científico de Beca de Estudio: Herrera, Macarena Lorena (2015-2016)

Resumen

Las líneas celulares continuas (LCC) derivadas de tejidos de mamíferos no sólo representan herramientas invaluables para las ciencias de la vida, sino que también constituyen importantes sustratos celulares animales para la producción de diversos tipos de productos biológicos. Uno de los linajes más frecuentemente utilizados con estos propósitos es la línea celular Vero, establecida a partir de los fibroblastos de riñón de mono verde africano adulto (Cercopithecus aethiops). El cultivo primario de este tejido se inició en 1962, en la Universidad Chiba de Japón. A partir de éste, se obtuvieron varias sublíneas celulares y una de ellas fue la línea celular Vero C76 (ATCC®CCL-81).La línea celular Vero posee las características beneficiosas de la mayoría de las LCC (rápido crecimiento, inmortal, más o menos estable, clonal y de fácil obtención) y es recomendada por la Organización Mundial de la Salud (OMS) para la producción de vacunas de uso humano. Ha sido utilizada, luego de su propagación en “microcarriers”, para la producción de vacunas de base viral para el tratamiento de rabia, polio, enterovirus y hantavirus. Dada su importancia en salud humana, el estudio de esta línea celular reviste particular interés. Por ello, es fundamental conocer sus características citogenéticas y analizar su estabilidad cromosómica en el tiempo.Por otro lado, la amplia utilización de las líneas celulares que se utilizan en diversos campos de la investigación virológica, bioquímica y genética exige un control de las mismas que incluye el conocimiento detallado de su cariotipo. La transformación celular in vitro, que lleva al establecimiento de líneas, está siempre acompañada de cambios en el complemento cromosómico normal de las células de origen. Existe una marcada variabilidad en el número de cromosomas de las líneas de largo término y que afectaría, como consecuencia, su estabilidad. Sin embargo, pueden preservarse cromosomas denominados marcadores que ayudarían a identificar a las líneas celulares in vitro. Los cromosomas marcadores son cromosomas supernumerarios que presentan una morfología diferente a la de los cromosomas del cariotipo normal de las células en cuestión y cuyas partes no pueden ser identificadas. Son producto de reordenamientos cromosómicos y caracterizan frecuentemente a las células tumorales. Teniendo en cuenta lo mencionado anteriormente, el objetivo de la presente investigación durante el período de beca fue caracterizar dos subclones de la línea celular Vero y analizar las posibles modificaciones a nivel genético (alteraciones cromosómicas) que las mismas pueden experimentar a lo largo de su adaptación a condiciones de cultivo en monocapa, mediante distintas técnicas citogenéticas de bandeo cromosómico. Los resultados obtenidos del presente estudio permitirán comparar ambas líneas celulares y establecer cuál de ellas es cromosómicamente más estable en el tiempo y, por ende, de mayor utilidad para el desarrollo de una plataforma de producción de virus para la fabricación de vacunas humanas.

Palabras clave
Citogenética
Células Vero
Vacunas
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