Informe Científico de Investigador

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Examinando Informe Científico de Investigador por Autor "Balatti, Pedro Alberto"

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  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Balatti, Pedro Alberto (2003-2005)
    (2016) Balatti, Pedro Alberto
    He trabajado en el proyecto de fijación de nitrógeno tanto desde el punto de vista de la diversidad de rizobios que fijan nitrógeno como desde el punto de vista de la planta. En lo que hace a la planta se idenfificaron los cultivares provenientes de tres semilleros distintos esto es Semillero Santa Rosa, Nidera Semillas y Don Mario cultivares con alta y baja capacidad de nodulación. En los tres casos y aun cuando ellos manejan distintos padres el los cultivares de alta capacidad de nodulacion desarrollaron entre 2,5 y 3 veces mas nódulos que los cultivares de baja capacidad. De esta manera ademas seleccionaron los padres para realizar cruzamientos con el fin de realizar un mapa de marcadores asociados a genes de nodulacion. Se decidió trabajar con los cultivares de Nidera semillas y los estudios realizados permitieron identificar cuatro cultivarres que se cruzaron. A fines del 2011 y principios del año 2012, el trabajo se concentró en el mapeo de una población. Con el objeto de obtener una población segregante, se multiplicaron semillas F1 proveniente de cruzamiento entre individuos con capacidad contrastante de nodulación. Previamente para confirmar que efectivamente la planta F1 era híbrido, se analizó mediante marcadores moleculares tipo microsatélites. Los productos de amplificación de SSR-PCR se resolvieron en geles de agarosa haciéndose hincapié en aquellos que fueron contrastantes entre los progentores. Durante la campaña 2011-12, las semillas F2 obtenidas se sembraron en condiciones controladas de luz y temperatura, en invernáculos ubicados en instalaciones de la empresa semillera Nidera Semillas SA. Sobre dichas plantas se tomaron muestras de tejido verde para la evaluación molecular. Para mitad de año 2012 se cosecharon semillas F3 sobre cada planta F2, las que constituyeron familias F2:3. Se realizó una evaluación genotípica sobre plantas F2, y el fenotipado se lo hizo sobre la población F3 (familias) para poder utilizar un diseño estadístico con repeticiones.
  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Balatti, Pedro Alberto (2007-2008)
    (2016) Balatti, Pedro Alberto
    El tema de trabajo estuvo centrado en la interacción planta microorganismo en tres ejes centrales, en relaciones planta microorganismo patógeno hospedante como son la simbiosis rizobio-leguminosa Poroto-Phaeoisariopsis griseola, Tomate-Cladosporium fulvum, un tercer efe de investigación es el desarrollo de métodos de diagnóstico rápido de enfermedades en especies horticolas. Se continuó con los trabajos en la simbiosis rizobio-leguminosas. En este sentido se continuan los largos estudios tendientes a analizar la diversidad de rizobios que se encuentran en lo suelos de áreas sin historia y con historia del cultivo de soja. En las áreas sin historia del cultivo de soja se han colectado y caracterizado aproxiamadamente unos 160 aislamientos. Un grupo menor de aproximadamente 60 nodulan y fijan nitrógeno en Cowpea aunque no lo hacen con poroto ni con soja. La eficiencia de estas cepas fue baja, excepto un par de aislamientos que demostraron en base a la reducción de acetileno y el peso seco de la parte aerea que tienen una mayor aptitud fijadora de N. El resto de los aislamientos aproximadamente 100 son simbiontes de la soja o al menos nodulan y fijan N con ella, estos aislamientos también fueron evaluados en lo que hace a su capacidad para fijar N. Además, se han realizado aproximadamente unos 400 aislamientos provenientes de campos con distintas historias de manejo. Hemos determinado el número de rizobios presentes en esos suelos y hemos caracterizado fisiologicamente a estos aislamientos, ahora estamos constrastando sus perfiles BOX para ver que tan similares son éstos aislamientos con las estirpes inoculadas, en principio E109, aunque también incluímos las cepas utilizadas en los inoculantes de otros paises. Además, en rizobium estamos trabajando en la genética de la sobrevivencia hemos aislado mutantes con un carácter de sobrevivencia alterado y estamos intentando caracterizar el gen inactivado, sabemos que el mutante es el resultado de una insersión simple y que el gen se expresa en el simbiosoma o tardiamente en la simbiosis pero no durante la infección y desarrollo del nódulo.
  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Balatti, Pedro Alberto (2012)
    (2012) Balatti, Pedro Alberto
    Se analizó la diversidad genética existente en los rizobios de crecimiento rápido que nodulan la soja. Por medio de la reacción en cadena de la polimerasa y con diversos primers se generaron marcadores ERIC, REP y RAPD. Además, se amplificó el RNA de 16S el que restringión con endonucleasas. Por medio de estos marcadores se estableció, entre los representantes de Sinorhizobium fredii aislados de la China y Vietnam y Rhizobium sp. NGR234, la diversidad genética existente entre ellos. Además se obtuvo la secuencia completa del 16S AND, el análisis de esta secuencia indicó en primer lugar que Rhizobium sp NGR234 es un Sinorhizobium fredii. En segundo lugar que dos estirpes de de rizobios de crecimiento rápido HH303 y SMH13 pertenecen a otra especie de rizobios aún no descripta. Esto se debe a que presentan no solo diferencias genéticas sino además diferencias en su comportamiento. Se analizó la diversidad genética existente en 10 cultivares comerciales de poroto y se encontró que la diversidad genetica es baja lo cual se observó por medio de marcadores RAPD. Estos marcadores moleculares y los ISSR permtieron asociar a los cultivares de poroto de acuerdo al pool de origen en Mesoamericanos y Andinos. Por otro lado estos trabajos permitieron observar que el porcentaje de cruzamiento del poroto probablemente sea superior al 10%. En la simbiosis rizobio soja se está estudiando la respuesta de los rizobios de crecimiento rápido Sinorhizobium fredii y lento Bradyrhizobium japonicum al efecto de diversos factores ambientales. Para cumplir con estos objetivos se utilizan técnicas microbiológicas convencionales junto con técnicas moleculares. Se ha estudiado el fecto del estrés de agua sobre la sobrevivencia y se encontró que potenciales de agua del suelo equivalentes al punto de marchitez permanente provovan la muerte de los rizobios, aunque los Bradyrhizobios demostraron una capacidad de sobrevivencia superior a los Sinorhizobium fredii. En suelos a capacidad de campo, las dos bacterias muestran capacidad de sobrevivencia aunque la dinámica de cada una de las especies en el suelo fue distinta. También se estudió la respuesta de los Sinorhizobios y los Bradyrhizobios al pH del suelo y se encontró que al menos ciertas cepas de Sinorhizobium no se adaptan a pH ácidos. Se realizaron estudios con nuevos aislamientos de Sinorhizobium fredii y se aislaron un conjunto de cepas que se adaptan a suelos ácidos, habiéndose encontrado un rango casi contínuo de respuestas a la acidez, especialmente con tres de los aislamientos. Uno de ellos es una bacteria que desarrolla a pH tan bajos como 5.5. Además se han generado mutantes por inserción de un transposon que origina uniones transcripcionales, que permite estudiar la expresión de genes. En base a esto se han aislado unos 20 mutantes en los que se inactivaron genes que se inducen con estres de pH o que generan morfología de colonias distintas lo que en definitiva es una forma de selección de mutantes. En lo que hace al poroto Phaseolus vulgaris se han realizado estudios utilizando marcadores moleculares RAPD e ISSR para identificar la diversidad genética existente en cultivares silvetres y primitivos de poroto que han demostrado un alto nivel de resistencia al ataque del hongo Phaeisariopsis griseola. Este hongo se encuentra dsitribuído en toda la zona de cultivo y en los ultimos años ha provocado grandes ataques, debido a la falta de materiales resistentes y a las condiciones ambientales imperantes en la zona. Hemos realizado una cantidad importante de aislamientos del hongo en la zona de cultivo, asi que disponemos de los primeros aislamientos argetinos y seguimos realizando aislamientos en diversas areas de cultivo. El objetivo de esto es tener elementos de diagnóstico para diseñar una estrategia para controlar la enfermedad. Hemos caracterizado en parte algunos de estos aislamientos, en base a su patogenicidad sobre un total de 12 cultivares diferenciales de poroto y en base a marcadores moleculares. En estos momentos se están realizando los cruzamientos de plantas para obtener las F2 con el fin de hacer los análisis de segregación con el fin de identificar en plantas marcadores moleculares asociados a genes de resistencia a la enfermedad. Los estudios reealizados sobre la interacción rizobio soja son particularmente importantes para lo provincia de Buenos Aires. En primer lugar porque el cultivo de la soja es una fuente de divisas importante para la provincia. En segundo lugar porque las fabricas de inoculantes que son, entre otros, los destinatarios de estos estudios se encuentran ubicadas en la provincia de Buenos Aires. En cuanto a los inconvenientes que se suscitaron estos fueron el resultado de la crisis exonómica que sacudió al país. Esto hizo que no se produjeran los desembolsos de subsidios otorgados. Esto junto con el hecho de que nuestros insumos se cotizan a valor dolar y a que la devaluación triplico el valor de los mismos, hizo que tuviesemos que reducir sustancialmente la actividad en el laboratorio Esto ocurrió a tal punto que en el caso de dos de los trabajos enviados para su publicación hubo que realizar una cooperación con investigadores del exterior para realizar experimentos adicionales sugeridos por los revisores, por lo cual se debió incluir en la publicación a los investigadores extranjeros.
  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Balatti, Pedro Alberto (2013-2014)
    (2014) Balatti, Pedro Alberto
    En lo que hace a los estudios de Bradyrhizobium japonicum se finalizaron los estudios de mapeo de SSR asociados a QTLs de nodulación en cultivares de soja. Se están analizando los resultados y el becario Darío Salvucci ha finalizado su manuscrito final lo ha entregado a los evaluadores y esta esperando le den fecha de defensa. . En este sentido se identificaron en una población de soja proveniente de un cruzamiento entre un cultivar de alta y otro de baja capacidad de nodulación, QTLs asociados a alta nodulación esto será una contribución importante para el mejoramiento de soja en el país.En lo que hace al análisis de los aislamientos de Bradyrhizobium japonicum de suelos con historia del cultivo de soja se identificó que los aislamientos tienen un considerable grado de variabilidad y que dentro de ellos se identificaron algunos con capacidad para solubilizar P del suelo y con diversa capacidad de sobrevivencia. La tesista Graciela Pastorino esta escribiendo su tesis de doctorado. Por otro lado se identificó que algunos aislamientos difieren en su capacidad de fijar nitrógeno y se vio que si bien estos son diferentes a nivel del genoma, no presentan sustanciales diferencias en los fragmentos de ADN del genoma que codifican los genes de fijación de nitrógeno. Solo se encontró que los mismos difieren en el gen nodP que codifica una proteína que es extruida de la célula bacteriana. Tampoco se encontró cambios en la expresión de los genes de nodulación y fijación en estos aislamientos. La becaria Silvina Lopez ha finalizado sus trabajos y está redactando su tesis para acceder al grado de doctor.En lo que hace a patógenos vegetales se han analizado mas aislamientos de Passalora fulva y se secuenciaron los genes de avirulencia. Se encontró que si bien solo hay dos razas de este patógeno en las zonas evaluadas, los genes de avirulencia presentan mutaciones o cambios en su secuencia que no es mas que el reflejo de la evolución que sufre el organismo en estos ambientes, lo que podría originar variantes mas agresivas. En cuanto a otro patógeno del tomate Stemphylium solani hemos realizado mas aislamientos y analizado la identidad y la severidad de los mismos cuando son inoculados en tomate. En estos momentos estamos obteniendo el genoma completo de un aislamiento para proceder a dilucidar las bases moleculares de su patogenicidad en tomate.En cuanto al trabajo con entomopatógenos se trabajo en la caracterización de los aislamientos de Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae en lo que hace a la capacidad de control biológico de los diversos aislamientos, la diversidad genética de los aislamientos y en su cultivo in vitro, para proceder a la producción Por otro lado también se trabajón con los organismos endosimbiontes de Dalbulus maydis, se identificaron los sitios en donde se encuentran los mismos, se aplificaron con un set de primers específico un fragmento parcial del 16S y se identico al manos a uno de los endosimiontes como Candidatus suelcia muelleri.
  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Balatti, Pedro Alberto (2015-2016)
    (2016) Balatti, Pedro Alberto
    Mi trabajo de investigación tiene como objetivo utilizar a las herramientas moleculares para conocer las interacciones básicas planta microorganismos tanto de aquellas positivas como es la simbiosis rizobio-leguminosa como de interacciones negativas como son las relaciones patógeno hospedante. Mi trabajo en relación con los patógenos tiene como eje dos patologías que socurren con frecuencia en los cultivos de tomate bajo cobertura. Una es el moho de la hoja del tomate enfermedad provocada por Cladosporium fulvum y la otra es la mancha gris de la hoja del tomate que tiene como agente causal a Stemphylium lycopersici. En el caso de Cladosporium estudio las poblaciiones del hongo con el fin de determinar la presencia de razas utilizando como herramienta a los genes de avirulencia. Si bien las razas por el momento parecerían ser solo dos, he detectado polimorfismos de los genes de avirulencia. En lo que hace a Stemphylium tambien he estudiado la poblacion del hongo y hemos encontrado en primer lugar que todos son S. lycopersici y por otro lado que los aislados difieren en su virulencia. Estoy haciendo genómica comparativa de los aislados de Stemphylium que difieren en su virulencia y sporulaciión y transcirptómica,con el fin de detectar los genes claves en la patogénesis. Por otro lado estamos trabajando en el analisis de los endofitos de tomate que hemos encontrado vienen en la semilla y estamos analizando si podemos introducirlos en plantas de tomate. Ademas estudio su capacidad para biocontrolar patogenos o promover el crecimiento de las plantas. Por otro lado continuo estudiantdo la simbiosis rizobio soja en particular con aislados de suelos con historia del cultivo de la soja que se destacan por su capacidad de fijación de nitrógeno.