Informes de Investigación

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Examinando Informes de Investigación por Autor "Alippi, Adriana Mónica"

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  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Alippi, Adriana Mónica (2012-2013)
    (2013) Alippi, Adriana Mónica
    Objetivo general: Desarrollar alternativas biológicas no contaminantes para el control de loque americana mediante el empleo de cepas bacterianas antagónicas e investigar las bases genéticas de la resistencia a tetraciclina en las poblaciones de Paenibacillus larvae y otras especies de bacterias Gram (+) presentes en miel. Los principales resultados obtenidos durante el período informado se resumen a continuación: 6.1.Se determinó la presencia del determinante tetL en plásmidos mobilizables aislados decepas de P. larvae con alta resistencia a tetraciclina provenientes de EE.UU. Se obtuvieron las secuencias completas de los plásmidos pPL373, pPL374 y pPL395 provenientes de las cepas del patógeno rtesistentes a tetraciclina (Tc) y oxitetraciclina (OTC) pero sensibles a minociclina (Mn). Dichas secuencias se depositaron en el GenBank con los números de acceso KF 433938 para pPL373, KF 536616 para pPL374 y KF440690 para pPL395. Se demostró experimentalmente la transferencia del plásmido pPL374 en la cepa de B. subtilis m351 y del plásmido pPL373 en la cepa de B. subtilis GSY1104 mediante conjugaciones en medio líquido. Al examinar ambas cepas dadoras de P. larvae PL373 y PL374 mediante la técnica de lisis in situ se observaron dos plásmidos de aproximadamente 5.000 pb y 8.000 pb, pero sólo el plásmido más pequeño era el que contenía el gen de resistencia a Tc. Luego de efectuar la secuenciación completa de los dos plásmidos más pequeños obtenidos de las cepas pPL373 y pPL374 confirmamos que el gen de resistencia era el tetL y no el tetK como creímos en un principio y que ambos replican por el mecanismo de círculo rodante encontrado en pequeños plásmidos movilizables de alto número de copias presentes en bacterias Gram (+). Todos los experimentos de conjugación empleando la cepa PL395 conteniendo solamente el plásmido pPL395 de 5.000 bp resultaron infructuosos, no obstante el pPL395 si pudo transferirse por electroporación a una cepa de P. larvae TcS. Los plásmidos pPL373 y pPL374 también pudieron transferirse por electroporación a la misma cepa de P. larvae TcS. En todos los casos los plásmidos se mantuvieron en forma estable en sus respectivos aceptores. La presencia de plásmidos con secuencias muy similares aislados de bacterias Gram (+) provenientes de distintas zonas geográficas y de distintos nichos ecológicos (suelo, hábitats marinos, alimentos) de los géneros Bacillus, Paenibacillus, Sporosarcina, Lactobacillus y Bhargavaea sugieren que los genes mob presentes en dichos plásmidos están involucrados en una exitosa THG. El uso extensivo de Tc y OTC para el control de loque americana en algunos países de América pudo haber contribuido al incremento del número de cepas resistentes de P. larvae, favoreciendo la transferencia de estos plásmidos entre cepas del mismo patógeno o desde o hacia otras especies de bacterias Gram (+) de los géneros Lactobacillus, Bacillus y Paenibacillus que pertenecen a la microbiota de la colmena (miel, tractos digestivos de abejas adultas y larvas, superficies florales y polen). El uso prolongado de tetraciclina en las colmenas afectadas por loque americana y otras enfermedades bacterianas estaría favoreciendo la ocurrencia de eventos de transferencia genética horizontal como se demostró en cepas del patógeno provenientes de EE.UU.
  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Alippi, Adriana Mónica (2014-2015)
    (2015) Alippi, Adriana Mónica
    Existe un creciente interés en el desarrollo de métodos de control de enfermedades apícolas que ayuden a reducir el uso de agroquímicos evitando contaminación de la miel. La enfermedad más grave de la etapa larval es la loque americana causada por la bacteria esporulada Gram positiva Paenibacillus larvae por lo que los objetivos de este trabajo apuntan al desarrollo de microorganismos como controladores biológicos directos o como productores de biocidas activos frente al patógeno. Estos antimicrobianos naturales permiten disponer de una alternativa deseable a los sintéticos ya que tienen baja toxicidad en mamíferos, poco efecto sobre el ambiente y amplia aceptación pública. Adicionalmente, mediante la investigación de las bases moleculares de la resistencia a tetraciclina en las poblaciones de P. larvae y bacterias esporuladas presentes en miel se pretende contribuir al conocimiento de la epidemiología de las cepas resistentes, evitando la difusión de las mismas hacia áreas de baja incidencia.
  • Informe de investigador
    Acceso Abierto
    Informe científico de investigador: Alippi, Adriana Mónica (2016-2017)
    (2017) Alippi, Adriana Mónica
    Existe un creciente interés en el desarrollo de métodos de control de enfermedades apícolas que ayuden a reducir el uso de agroquímicos evitando contaminación de la miel. La enfermedad más grave de la etapa larval es la loque americana causada por la bacteria esporulada Gram positiva Paenibacillus larvae por lo que los objetivos de este trabajo apuntan al desarrollo de microorganismos como controladores biológicos directos o como productores de biocidas activos frente al patógeno. Estos antimicrobianos naturales permitirían disponer de una alternativa deseable a los sintéticos ya que tienen baja toxicidad en mamíferos, poco efecto sobre el ambiente y amplia aceptación pública. Adicionalmente, mediante la investigación de las bases moleculares de la resistencia a tetraciclina en las poblaciones de P. larvae y bacterias esporuladas presentes en miel se pretende contribuir al conocimiento de la epidemiología de las cepas resistentes, evitando la difusión de las mismas.